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学习笔记 | TBST缓冲液的配置方法

更新时间:2026-01-06      点击次数:24

在蛋白质研究的实验室里,TBST溶液常年活跃在免疫印迹、免疫组化等关键生物实验中,它既能清除杂质的干扰,又能为蛋白质的特异性识别创造稳定的环境。

TBST溶液的英文全称是:Tris-Buffered Saline with Tween-20,中文对应为:三羟甲基氨基甲烷缓冲盐水-吐温20。从名称中就能够清晰的看出它的核心成分:有作为缓冲基础的Tris(三羟甲基氨基甲烷)、提供离子强度的生理盐水成分(通常是氯化钠),以及作为非离子型去污剂的Tween-20(吐温20)。这三种成分按精准比例混合溶解后,再将pH值调节至7.4左右(该pH值接近人体生理pH,能维持蛋白质的天然构象),就形成了实验室常用的TBST溶液。和很多实验室的试剂一样,TBST也常配置为浓缩液,使用时用去离子水稀释至1倍工作液,兼顾储存便利性和浓度准确性。

以下是10× TBST溶液的配置方法:

 10X TBST.pdf

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富沃克 TBST洗膜缓冲液10X TBS+吐温抗体稀释液 WB洗膜封闭液配制

使用TBST溶液时,以下几个注意事项需要谨记:

1. 操作规范:虽然TBST相对温和,但仍需佩戴手套、实验服等防护用品,避免直接接触皮肤和眼睛,若不慎接触,需立即用大量蒸馏水冲洗。

2. 稀释与配置:浓缩液稀释时必须使用无杂质的蒸馏水或去离子水,自来水中的金属离子、微生物可能会干扰实验结果;配置时要确保各成分完全溶解,并使用pH计校准PH值至7.4±0.2。

3. 储存条件:1倍工作液建议现配现用,若需短期储存,应密封后置于4℃冰箱中,储存时间不宜超过一周;浓缩液可在常温或4℃冷冻储存。

4. 废液处理:使用后的TBST溶液需按照实验室废液处理规范收集,不可直接倒入下水道,尤其是含有抗体或蛋白质的废液,需经过灭菌处理后再排放,避免污染环境。


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