Tris-HCl 平衡苯酚

Tris-HCl 平衡苯酚 

●配制

1. 原料要求：避免使用粉红/黄色液化苯酚及未重蒸结晶苯酚（结晶苯酚需 160℃重蒸除醌类氧化产物，以防核酸降解或交联），优先选用分子生物学级苯酚。

2. 苯酚融解：-20℃结晶苯酚室温复温后，68℃水浴融解。

3. 添加剂加入：加羟基喹啉至终浓度0.1%（兼具还原、弱抑RNA 酶、螯合金属离子及指示有机相作用）。

4. 平衡操作：

（1）加等体积1M Tris-HCl（pH8.0），磁力搅拌15分钟，分层后弃水相，重复1次；

（2）加等体积0.1 M Tris-HCl（pH8.0），磁力搅拌15分钟，分层后弃水相（残留少量水相）。

5. pH 验证：有机相 pH≥7.8（避免酸性条件下 DNA 分配至有机相）。

6. 保存：棕色瓶 4℃避光保存。

▲注意

1.苯酚腐蚀性极强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜等。

2.所有操作均应在通风橱中进行，与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。