10×TBST (配制量：1L)

10×TBST (配制量：1L)

█组分

●配制

1.称取 121 g Tris 碱、55 g 硼酸、87.66 g NaCl，置于 1 L 烧杯中。

2.加入约 800 ml 去离子水，充分搅拌至所有固体完全溶解。

3.加入 10 ml Tween-20，继续搅拌 10–15 min，确保表面活性剂均匀分散。

4.室温下用浓盐酸将溶液 pH 调至 7.5–8.0。

5.将溶液转移至 1 L 容量瓶，用去离子水定容至刻度线，颠倒混匀数次。

6.高温高压灭菌（121℃，20 min），冷却后室温密封保存。使用时稀释 10 倍，即得 1× TBST 工作液。

▲注意

1.Tween- 20 易产生泡沫，搅拌时转速不宜过快；若配制后出现少量泡沫，可静置片刻再定容。

2.该缓冲液的 pH 会影响蛋白抗原抗体结合效率，需严格校准至目标值。

3.母液室温可稳定保存 3 个月，若出现浑浊、异味，说明已污染，需重新配制。