DNase I溶液

DNase I（脱氧核糖核酸酶I）是一种非特异性核酸内切酶，可切割单链和双链DNA，在分子生物学实验中主要用于去除RNA样本中的基因组DNA污染、降低细胞裂解液粘度以及DNA缺口平移和片段化。该酶通常从牛胰腺纯化获得，分子量约29-32kDa，其活性依赖钙离子，并由镁离子或锰离子激活。活性单位的定义为：37℃、10分钟内完全降解1μg质粒DNA所需的酶量。

不同实验场景对DNase I的等级要求不同。RNA相关实验（如RT-PCR、Northern blot、体外转录）需使用无RNase级DNase I，这类产品经严格检测确保无RNase残留，避免RNA被降解。蛋白提取实验中，若裂解液因染色体DNA释放而过度粘稠，可使用蛋白级DNase I处理以降低粘度、改善移液操作，该等级未经RNase-free处理。细胞复苏后解离细胞悬液时，DNase I可降解冻存或高密度细胞释放的DNA，减少细胞结块和聚集。此外，DNase I还可用于缺口平移标记DNA及制备随机DNA片段。

DNase I的活性受多种因素影响。二价阳离子是必要条件——钙离子稳定酶分子构象，镁离子或锰离子作为催化激活剂。使用含EGTA的缓冲体系或无钙环境会显著抑制活性。高浓度单价离子（如100mM Na⁺或K⁺）同样会降低酶活性，反应体系设计时应留意盐浓度。失活处理时，通常加入EDTA至终浓度2.5-5mM螯合镁离子，随后65-75℃加热10分钟。若体系中同时含有RNA且需避免RNA降解，需确保EDTA浓度足以完全螯合镁离子后再加热。

常见产品规格包括1mg/mL、1U/μL、2000U/mL及2500U/mL，部分产品附带10×反应缓冲液。保存条件为-20°C，不宜存放于无霜冰箱（自动除霜导致的温度波动会加速酶活性下降）。使用前应将DNase I平衡至室温并短暂离心收集管壁液体，操作时保持酶液置于冰上。

杭州富沃克生物科技有限公司提供多种规格的DNase I溶液产品，涵盖无RNase级和蛋白级，适用于RNA样本DNA去除、细胞裂解液处理等实验场景。

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