█组分
组分 | 浓度 | CAS |
Tryptone | 1.2%(W/V) | 91079-40-2 |
YeastExtract | 2.4%(W/V) | 8013-01-2 |
Glycerol | 0.4%(V/V) | 56-81-5 |
KH2PO4 | 17mM | 7778-77-0 |
K2HPO4 | 72mM | 7758-11-4 |
●配制
1.配制磷酸盐缓冲液(0.17M KH2PO4和0.72M K2HPO4)100ml,溶解2.31gKH2PO4和12.54g K2HPO4于90ml的去离子水中,搅拌溶解后,加去离子水定容至100ml,高温高压灭菌。
2.称取12g Tryptone、24g YeastExtract和4ml Glycerol,置于1L烧杯中。
3.加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。
4.加去离子水将培养基定容至1L,高温高压灭菌。
5.待溶液冷却至60℃以下时,加入100ml的上述灭菌磷酸盐缓冲液。
6.4℃保存。
▲注意
1.磷酸盐缓冲液需单独配制灭菌,KH2PO₄与K2HPO₄易吸潮,称量后及时密封试剂瓶,确保浓度精准;溶解时充分搅拌,避免缓冲能力偏差。
2.Glycerol(甘油)具粘稠性,称量时沿烧杯壁缓慢加入,用少量去离子水冲洗残留,确保完全转移;培养基灭菌后需冷却至60℃以下再加入缓冲液,防止高温破坏缓冲体系稳定性。