TB/Amp培养基(配制量：1L)

TB/Amp培养基(配制量：1L)

█组分

●配制

1.配制磷酸盐缓冲液(0.17M KH2PO4和0.72M K2HPO4)100ml，溶解2.31gKH2PO4和12.54g K2HPO4于90ml的去离子水中，搅拌溶解后，加去离子水定容至100ml，高温高压灭菌。

2.称取12g Tryptone、24g YeastExtract和4ml Glycerol，置于1L烧杯中。

2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。

3.加去离子水将培养基定容至1L后，高温高压灭菌。

4.待溶液冷却至60℃以下时，加入100ml的上述灭菌磷

酸盐缓冲液和1ml的Ampicillin（100mg/ml）。

5.均匀混合后4℃保存。

▲注意

1.磷酸盐缓冲液需单独配制灭菌，KH2PO4与K2HPO4易吸潮，称量后立即密封试剂瓶，精准控制用量以保证缓冲浓度（0.17M KH2PO4、0.72M K2HPO4）；溶解时充分搅拌至无残留，避免缓冲能力偏差。

2. Glycerol（甘油）具粘稠性，沿烧杯壁缓慢滴加，用少量去离子水冲洗容器残留以确保完全转移；培养基冷却至60℃以下后，在超净台内同步加入灭菌缓冲液及1ml 100mg/ml Ampicillin，Ampicillin不耐高温，严禁提前加入，避免活性丧失。