抗生素贮存液(配制量：按需配制，建议单份分装 1–5 ml，避免反复冻融）

█组分

氨苄青霉素 / 羧苄青霉素 50 mg/ml（溶于水）、氯霉素 34 mg/ml（溶于乙醇）、卡那霉素 10 mg/ml（溶于水）、链霉素 10 mg/ml（溶于水）、四环素 5 mg/ml（溶于乙醇）。

●配制

1.称量溶解：以水为溶剂的抗生素（氨苄青霉素、羧苄青霉素、卡那霉素、链霉素）：精准称量对应质量，加入无菌去离子水，磁力搅拌至完全溶解。以乙醇为溶剂的抗生素（氯霉素、四环素）：精准称量对应质量，加入无水乙醇，搅拌溶解。

2. 除菌处理：水溶液抗生素：使用 0.22 μm 无菌滤器过滤除菌。乙醇溶液抗生素：无需额外除菌。

3. 分装保存：将溶液分装至无菌棕色冻存管，标注抗生素名称、浓度、配制日期，置于 - 20℃避光保存。

4. 工作液配制：使用前根据质粒类型（严紧型/松弛型），将贮存液按比例稀释至工作浓度，混匀后立即使用。

▲注意

1.水溶液抗生素需经 0.22 μm 滤器过滤除菌，乙醇溶液抗生素无需除菌，所有溶液均需在棕色不透光容器中保存，防止降解。

2.贮存液需小份分装，避免反复冻融导致活性下降，-20℃保存有效期通常为 3–6 个月。

3.四环素筛选时，培养基需不含镁盐（如 LB 培养基），因镁离子是四环素的拮抗剂，会影响筛选效果。